細(xì)胞STR鑒定

細(xì)胞鑒定的目標(biāo)是確認(rèn)細(xì)胞的身份真實(shí)性，排除交叉污染。細(xì)胞 STR（短串聯(lián)重復(fù)序列）鑒定是目前國際通用的細(xì)胞系身份認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)，通過分析這些STR 位點(diǎn)信息，確認(rèn)細(xì)胞系真實(shí)性、排除交叉污染（如 HeLa 細(xì)胞污染），從而為科研領(lǐng)域、生物制藥領(lǐng)域、臨床應(yīng)用提供可靠的細(xì)胞身份保障，保障數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可復(fù)制性，保障生產(chǎn)的安全性。

性別鑒定的應(yīng)用場景

性別鑒定在個體識別、親子鑒定、刑事偵察中有著非常重要的作用。特別面對微量檢材、陳舊檢材時對鑒定方法的要求更高，需要檢測方法適合微量取材、檢測方法更準(zhǔn)確、更靈敏和更快速。

性別鑒定的檢測方案

1）細(xì)胞學(xué)染色法進(jìn)行性別鑒定方案

可采用染色法進(jìn)行性別鑒定。人類體細(xì)胞中含有23對常染色體和1對性染色體，一對性染色體即X染色體和Y染色體。一般來說，女性有2條X染色體，男性為1條X和1條Y染色體?？刹捎眉?xì)胞培養(yǎng)、吉姆薩方法染色，根據(jù)染色體上的帶紋可識別染色體，進(jìn)行性別鑒定，這種檢測方法結(jié)果直觀、易于判讀，但是檢測時耗時、成本高。

2）利用分子生物學(xué)法進(jìn)行DNA檢測判斷性別

當(dāng)前有一種高效、靈敏、準(zhǔn)確度高、操作簡單的性別鑒定方案，就是DNA分子檢測，其中PCR擴(kuò)增是相對簡單的檢測方案，如：單純擴(kuò)增Y染色體特異性DNA、同時擴(kuò)增X及Y染色體同源DNA片段、同時擴(kuò)增X、Y染色體特異性片段鑒定性別。如果只擴(kuò)增Y染色體特異性序列時，可能會因?yàn)閿U(kuò)增失敗導(dǎo)致假陰性。

同時擴(kuò)增X及Y染色體同源DNA片段是一種有效的手段，目前常見的基因有兩個：ZF基因和AMEL基因。ZF是鋅指狀蛋白基因，AMEL基因編碼牙釉質(zhì)蛋白。這兩個基因均是X、Y染色體同源的基因。通過擴(kuò)增含有差異序列的片段，來區(qū)分X和Y染色體。

鋅指狀蛋白基因(zine finger protein gene,ZF)是X和Y染色體的同源基因，但是3’序列略有差異，用特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增時可產(chǎn)生不同的片段，女性只產(chǎn)生一條片段，男性可產(chǎn)生2條片段。

Amelogenin(AMEL)基因是另外一個性染色體同源的基因，編碼一種牙釉質(zhì)蛋白，AMEL 基因的致病性突變會導(dǎo)致牙釉質(zhì)發(fā)育不全。利用AMEL-X和AMEL-Y序列的差異可以進(jìn)行性別鑒定。AMEL-X和AMEL-Y有很高的同源性，X染色體AMEL內(nèi)含子1中有6 bp丟失，第5外顯子有3 bp的缺失，可針對性設(shè)計(jì)特異性引物序列，產(chǎn)物片段大小不同，可用于區(qū)分不同性別。

基于ZF和AMEL基因的PCR檢測方法簡便、靈敏、快捷，實(shí)踐中具有較高的應(yīng)用價值。

細(xì)胞鑒定中性別鑒定的檢測方案

目前很多的細(xì)胞鑒定數(shù)據(jù)庫中的性別鑒定位點(diǎn)選擇的都是AMEL基因，因?yàn)閿U(kuò)增片段長度比較短，對于一些存在裂解的樣本也能很好的完成檢測。常用的細(xì)胞鑒定數(shù)據(jù)庫中將AMEL基因作為性別鑒定基因，同時檢測CSF1PO、D5S818、D7S820、D13S317、D16S539、TH01、TPOX、vWA等STR位點(diǎn)，不同的細(xì)胞品系可以同數(shù)據(jù)庫中的信息進(jìn)行比對來確定細(xì)胞身份。